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目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30~60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45~60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.

作者:李志清;黄跃生;杨宗城

来源:中华烧伤杂志 2002 年 18卷 5期

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作者:
李志清;黄跃生;杨宗城
来源:
中华烧伤杂志 2002 年 18卷 5期
标签:
烧伤 内皮 核因子-κB 核抑制因子κBα
目的了解烧伤血清对内皮细胞核因子-κB (NF-κB)异二聚体p50/p65核移位,以及核抑制因子κB(IκB)α降解的影响,进一步探讨烧伤血清对内皮细胞的活化作用.方法采用体外培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,分别用正常人血清、烧伤患者血清、烧伤患者血清+吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)刺激内皮细胞,并以正常培养的内皮细胞为对照.应用激光共聚焦显微镜观察刺激30、60、120、480 min后内皮细胞p50/p65核移位情况,采用Western印迹法检测刺激30、60、90、120 min后内皮细胞IκBα蛋白降解的情况. 结果与对照组比较,烧伤血清刺激内皮细胞30 min后,p50、p65即发生核移位,30~60 min达高峰,2 h后恢复至刺激前状态;而烧伤血清刺激30 min后,IκBα发生降解(P<0.01),刺激45~60 min后最为明显,2 h后表达逐渐恢复.PDTC能有效抑制烧伤血清作用30、60 min后,p50、p65的核移位和IκBα降解. 结论烧伤血清可导致内皮细胞NF-κB p50、p65发生核移位,并使IκBα降解,进而活化NF-κB,诱导内皮细胞分泌细胞因子.PDTC对这一系列变化可能有抑制作用.