目的 探讨pH值降低对大鼠心肌细胞活力的影响并分析其可能机制. 方法 取新生SD大鼠5只,分离心脏培养原代心肌细胞,进行以下实验.(1)取原代心肌细胞,按照随机数字表法分为pH值7.4 +6 h组、pH值7.0 +6 h组、pH值6.5 +6 h组、pH值6.0+6h组、pH值6.5+1 h组和pH值6.5 +3 h组,每组4孔.pH值7.4 +6 h组、pH值7.0+6 h组、pH值6.5 +6 h组、pH值6.0+6h组细胞常规培养48 h后(下同)分别更换pH值为7.4、7.0、6.5、6.0的DMEM-F12(下同)培养基,培养6 h;pH值6.5+1 h组、pH值6.5 +3 h组细胞更换pH值为6.5的培养基,分别培养1、3h.噻唑蓝法检测细胞活力.(2)取原代心肌细胞,按照随机数字表法分为pH值7.4组、pH值6.5组和pH值6.5+紫杉醇组,每组2孔.pH值7.4组细胞更换pH值为7.4培养基,pH值6.5组和pH值6.5+紫杉醇组细胞更换pH值为6.5培养基,pH值6.5+紫杉醇组细胞另加入终物质的量浓度为0.2μmol/L紫杉醇,培养6h.免疫荧光法检测细胞微管形态及密度.(3)取原代心肌细胞,同实验(2)分组处理,每组2孔,蛋白质印迹法检测细胞聚合态和游离态微管蛋白表达.(4)取原代心肌细胞,同实验(2)分组处理,每组4孔,噻唑蓝法检测紫杉醇处理后细胞活力.对数据行单因素方差分析、LSD-t检验. 结果 (1)pH值7.4+6h组、pH值7.0+6h组、pH值6.5+6h组、pH值6.0+6h
作者:杨雷;赵利平;崔琳;黄耀;叶晶莹;张琼;张东霞;黄跃生
来源:中华烧伤杂志 2018 年 34卷 5期