目的 研制人源抗乙肝表面抗原(HBsAg)基因工程抗体.方法 采集多个HBsAg加强免疫后表面抗体阳性(HBsAb+)志愿者的外周血,分离淋巴细胞,构建人源抗HBsAg Fab噬菌体抗体基因文库.用纯化的HBsAg对抗体库进行富集筛选,经过序列测定确定抗体轻重链型别,分别克隆入真核细胞表达载体pAc-FcR和HL51-14,转染昆虫Sf9细胞和293T细胞,利用杆状病毒/昆虫细胞系统和哺乳动物细胞系统实现全抗体的分泌型表达.结果 成功筛选出20株抗HBsAg的人源Fab抗体并制备出其中6株的IgG全抗体,竞争性ELISA结果显示6株全抗体针对的是HBsAg 3个不同表位.结论 成功筛选并获得了6株针对3个不同表位的抗HBsAg的IgG全抗体,为治疗性抗体和新疫苗的研制奠定了基础.
作者:刘洋;孙丽娜;李川;张福顺;梁米芳;李德新
来源:中华实验和临床病毒学杂志 2012 年 26卷 3期