目的 初步建立白蛉病毒属Luminex多重液相芯片核酸检测方法.方法 设计立夫特谷热病毒(RVFV)、发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)和哈特兰德病毒(HLV)特异性引物和探针,采用靶序列富集多重PCR技术(Tem-PCR)对其靶序列进行扩增,并建立Luminex多重液相芯片核酸检测方法.利用RVFV、SFTSV和HLV靶序列Tem-PCR产物,以及汉滩病毒(HTNV)等7种出血热病毒核酸扩增产物评价其特异性,利用体外转录病毒RNA参考品评价其敏感性和稳定性.结果 建立的白蛉病毒属病毒Luminex多重液相芯片核酸检测方法可特异性检测RVFV、SFTSV和HLV靶序列,且与HTNV等7种出血热病毒无交叉反应.对体外转录获得的RVFV、SFTSV和HLV的RNA参考品,可分别检出103拷贝/μl、102拷贝/μl和102拷贝/μl.103拷贝/μl以上各浓度RNA参考品检测值的组内和组间变异系数均小于15%.结论 初步建立了白蛉病毒属Luminex多重液相芯片核酸检测方法,可有效检测RVFV、SFTSV和HLV,为相关传染病的实验室诊断奠定了基础.
作者:李阿茜;何程程;张硕;李川;张全福;梁米芳;李德新
来源:中华实验和临床病毒学杂志 2015 年 29卷 2期