目的在293细胞中表达人源化单链抗体/人白细胞介素-2(hIL-2)双功能融合蛋白及评价其生物学活性.方法将构建的表达载体转染293细胞,G418筛选阳性克隆建立稳定表达细胞系,免疫印迹法(Western blot)、酶联免疫吸附试验(ELISA)及[3H]脱氧胸苷(3H-TdR)渗入法检测细胞上清中融合蛋白浓度和生物学活性.结果融合蛋白浓度达(102.0±4.2)g/L,5μl细胞上清即可在45×103处呈现清晰蛋白条带.其中hIL-2无活性丢失,与标准对照比较差异无显著性(P>0.05);抗体的抗原结合活性有部分下降,与标准对照比较差异有非常显著性(P<0.01).结论该融合蛋白可在293细胞系中得到高效表达,其中hIL-2部分无活性丢失,抗体的活性有部分下降.
作者：李君；王学浩；王晓明
来源：中华实验外科杂志 2003 年 20卷 9期
