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目的 观察转录因子Sp1对人肿瘤细胞Ki-67基因表达的调控作用.方法 Sp1真核表达载体pN3-Sp1转染人宫颈癌Hela细胞、肾癌OS-RC-2细胞、肺癌A549细胞,蛋白免疫印迹法检测Hela细胞Sp1蛋白表达,细胞免疫组织化学检测3种肿瘤细胞Ki-67蛋白表达.pN3-Sp1与Ki-67基因核心启动子pGLBK235共转染上述3种肿瘤细胞,双荧光素酶报告基因系统检测启动子活性.以空载体pN3作为对照.结果 转染pN3-Sp1的Hela细胞Sp1蛋白表达量,是空载体对照组的2.4倍.转染pN3-Sp1的3种肿瘤细胞Ki-67蛋白表达量与pN3转染组比较均显著增加.pN3-Sp1、pGLBK235共转染3种肿瘤细胞的启动子转录活性均较单转染pGLBK235显著升高,在Hela、OS-RC-2、A549细胞中的启动子活性分别为仅转染pGLBK235的1.68、 1.34、1.83倍.结论 转录因子Sp1具有激活Ki-67基因转录作用.

作者:李望;钱国伟;徐为;田卉;李连涛;刘俊杰;陈菲菲;李慧中;章龙珍;郑骏年

来源:中华实验外科杂志 2011 年 28卷 3期

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作者:
李望;钱国伟;徐为;田卉;李连涛;刘俊杰;陈菲菲;李慧中;章龙珍;郑骏年
来源:
中华实验外科杂志 2011 年 28卷 3期
标签:
Ki-67基因 转录因子Sp1 Ki-67 promoter Transcription factors Sp1
目的 观察转录因子Sp1对人肿瘤细胞Ki-67基因表达的调控作用.方法 Sp1真核表达载体pN3-Sp1转染人宫颈癌Hela细胞、肾癌OS-RC-2细胞、肺癌A549细胞,蛋白免疫印迹法检测Hela细胞Sp1蛋白表达,细胞免疫组织化学检测3种肿瘤细胞Ki-67蛋白表达.pN3-Sp1与Ki-67基因核心启动子pGLBK235共转染上述3种肿瘤细胞,双荧光素酶报告基因系统检测启动子活性.以空载体pN3作为对照.结果 转染pN3-Sp1的Hela细胞Sp1蛋白表达量,是空载体对照组的2.4倍.转染pN3-Sp1的3种肿瘤细胞Ki-67蛋白表达量与pN3转染组比较均显著增加.pN3-Sp1、pGLBK235共转染3种肿瘤细胞的启动子转录活性均较单转染pGLBK235显著升高,在Hela、OS-RC-2、A549细胞中的启动子活性分别为仅转染pGLBK235的1.68、 1.34、1.83倍.结论 转录因子Sp1具有激活Ki-67基因转录作用.