目的 建立索拉非尼诱导肝癌耐药细胞株并研究耐药细胞的功能特性.方法 采用药物连续诱导法建立索拉非尼耐药细胞株模型;流式细胞术检测细胞凋亡率差异;实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测多药耐药(MDR1)基因表达变化;Western blot检测蛋白激酶B(Akt)和细胞外信号调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平差异.结果 耐药组和空白组比较:其细胞生存率(％)显著升高,差异有统计学意义(SK-HEP-1:61.73比30.92;HUH-7:54.14比20.73,P＜0.05);细胞凋亡率(％)显著下降,差异有统计学意义(SK-HEP-1:42.40比21.17;HUH-7:48.23比17.63,P＜0.05);MDR1耐药基因表达显著增加,差异有统计学意义(SK-HEP-1:10.87比1.59;HUH-7:9.58比1.23,P＜0.05);并且耐药组细胞Akt和ERK1/2磷酸化水平上调.结论 体外成功建立索拉非尼诱导的HUH-7和SK-HEP-1耐药细胞株,其耐药机制与Akt和ERK1/2磷酸化水平上调导致耐药基因MDR1表达增加相关.
作者：吴昶皓；张红卫
来源：中华实验外科杂志 2014 年 31卷 4期
