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目的 探讨CD160分子在荷瘤小鼠CD8+T淋巴细胞上的表达及其对CD8+T细胞活性和免疫功能的影响.方法 C57BL/6小鼠接种TC-1宫颈癌细胞建立小鼠荷瘤模型,免疫磁珠分选小鼠脾脏细胞获得CD8+T细胞,流式细胞术检测CD160在CD8+T细胞上的表达;流式细胞仪(FACS)分选CD8+T细胞获得CD160+ CD8+T细胞群和CD160-CD8+T细胞群,将两群细胞分别与肿瘤细胞抗原肽热休克蛋白70 (HSP70)-TC-1复合物和去除CD8+T的脾细胞混合,两群混合细胞各分为两组,其中一组同时加入CD160高亲和力配体单纯疱疹病毒侵入介导子(HVEM)的抗体,刺激培养6d,羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记法检测CD8+T细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞胞内穿孔素和γ-干扰素(IFN-γ)的表达.结果 荷瘤3周,小鼠CD8+T细胞上CD160分子的阳性率为(18.050 ±7.944)%,显著高于对照小鼠的阳性率[(8.663 ±3.921)%,P<0.01];刺激培养后,CD160+ CD8+T细胞群中增殖细胞比例为(3.425 ±2.352)%,显著低于CD160-CD8+T细胞群的(15.440±6.673)% (P<0.01),抗HVEM抗体阻断CD160与HVEM的相互作用后,CD160+ CD8+T细胞群中增殖细胞比例显著增高达到(12.000 ±5.286)% (P <0.01);同时,CD160+CD8+T细胞群中表达穿孔素和IFN-γ的阳性细胞率分别为(5.263±2.752)%和(4.150±2

作者:肖晗;孙红;刘秀珍;向飞艳;夏倩;向赟

来源:中华实验外科杂志 2015 年 32卷 7期

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作者:
肖晗;孙红;刘秀珍;向飞艳;夏倩;向赟
来源:
中华实验外科杂志 2015 年 32卷 7期
标签:
CD160 单纯疱疹病毒侵入介导子 CD8+T细胞 穿孔素 γ-干扰素 CD160 Herpesvirus entry mediator CD8+T cells Perforin γ-interferon
目的 探讨CD160分子在荷瘤小鼠CD8+T淋巴细胞上的表达及其对CD8+T细胞活性和免疫功能的影响.方法 C57BL/6小鼠接种TC-1宫颈癌细胞建立小鼠荷瘤模型,免疫磁珠分选小鼠脾脏细胞获得CD8+T细胞,流式细胞术检测CD160在CD8+T细胞上的表达;流式细胞仪(FACS)分选CD8+T细胞获得CD160+ CD8+T细胞群和CD160-CD8+T细胞群,将两群细胞分别与肿瘤细胞抗原肽热休克蛋白70 (HSP70)-TC-1复合物和去除CD8+T的脾细胞混合,两群混合细胞各分为两组,其中一组同时加入CD160高亲和力配体单纯疱疹病毒侵入介导子(HVEM)的抗体,刺激培养6d,羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记法检测CD8+T细胞增殖,流式细胞术检测各组细胞胞内穿孔素和γ-干扰素(IFN-γ)的表达.结果 荷瘤3周,小鼠CD8+T细胞上CD160分子的阳性率为(18.050 ±7.944)%,显著高于对照小鼠的阳性率[(8.663 ±3.921)%,P<0.01];刺激培养后,CD160+ CD8+T细胞群中增殖细胞比例为(3.425 ±2.352)%,显著低于CD160-CD8+T细胞群的(15.440±6.673)% (P<0.01),抗HVEM抗体阻断CD160与HVEM的相互作用后,CD160+ CD8+T细胞群中增殖细胞比例显著增高达到(12.000 ±5.286)% (P <0.01);同时,CD160+CD8+T细胞群中表达穿孔素和IFN-γ的阳性细胞率分别为(5.263±2.752)%和(4.150±2