目的 探讨在转化生长因子(TGF)β1致大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)发生上皮细胞向间质细胞转分化(EMT)过程中囊泡型H+-ATP酶(V-ATPase)B亚基的变化及其可能意义.方法 NRK52E细胞无血清培养后予TGF-β1(10 μg/L)刺激不同时间(0、6、12、24、48、72 h),应用实时定量PCR、Western印迹、免疫荧光技术检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏素(E-cadhefin)、V-ATPase B亚基(B1、B2)mRNA、蛋白表达及分布的变化.结果 TGF-β1刺激NRK52E细胞48 h后α-SMA mRNA及蛋白表达显著上调,E-cadherin mRNA及蛋白表达显著下调,同时V-ATPase B2亚基mRNA及蛋白表达也显著增加(均P<0.05).但是B1亚基在细胞内表达很低,刺激后也未见显著变化.免疫荧光也显示V-ATPase B2亚基在细胞内的分布明显增加并向胞膜聚集.结论 在NRK52E内主要分布的是V-ATPase B2亚基.TGF-B1刺激NRK52E EMT过程中V-ATPase B2亚基表达显著增加,这提示B2亚基可能参与肾小管EMT过程.
作者：曹雪芹；赵世莉；覃静；李晓艳；范瑾瑾；毛海萍；杨琼琼；余学清
来源：中华肾脏病杂志 2011 年 27卷 6期
