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目的 观察肾损伤分子1(KIM-1)对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响,探讨KIM-1参与糖尿病肾病肾间质纤维化(RIF)的可能机制.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRKS2E)并分为5组:(1)空白对照组(D-葡萄糖5.6 mmol/L);(2)高渗组(D-葡萄糖5.6 mmol/L+ D-甘露醇24.4mmol/L);(3)高糖组(D-葡萄糖30 mmol/L);(4) siRNA对照组;(5) KIM-1 siRNA组.ELISA法检测细胞上清液中MCP-1和FN蛋白水平;Western印迹法检测细胞KIM-1蛋白的表达;RT-PCR法检测细胞KIM-1、MCP-1、FN mRNA的表达.结果 与空白对照组相比,高糖组细胞KIM-1蛋白和mRNA的表达于12h时间点增高(P<0.05),48 h时达最高值(P< 0.05);MCP-1及FN蛋白和mRNA的表达于24 h时增多(P<0.05),48 h时达最高值(P<0.05).与高糖组相比,KIM-1siRNA转染组MCP-1及FN蛋白和mRNA表达显著减少(均P<0.05).结论 下调KIM-1的表达能显著抑制高糖条件下肾小管上皮细胞表达MCP-1和FN,提示KIM-1可能通过调控MCP-1及FN的表达参与糖尿病肾病肾间质纤维化(RIF)的进程.

作者:王刘伟;董吉;房豫东;陈凤梅;杨自君;陈军童;唐琳

来源:中华肾脏病杂志 2014 年 30卷 1期

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作者:
王刘伟;董吉;房豫东;陈凤梅;杨自君;陈军童;唐琳
来源:
中华肾脏病杂志 2014 年 30卷 1期
标签:
肾硬化症 上皮细胞 肾损伤分子1 siRNA Nephrosclerosis Epithelial cells Kidney injury factor-1 Small interfering RNA
目的 观察肾损伤分子1(KIM-1)对高糖诱导大鼠肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响,探讨KIM-1参与糖尿病肾病肾间质纤维化(RIF)的可能机制.方法 体外培养大鼠肾小管上皮细胞(NRKS2E)并分为5组:(1)空白对照组(D-葡萄糖5.6 mmol/L);(2)高渗组(D-葡萄糖5.6 mmol/L+ D-甘露醇24.4mmol/L);(3)高糖组(D-葡萄糖30 mmol/L);(4) siRNA对照组;(5) KIM-1 siRNA组.ELISA法检测细胞上清液中MCP-1和FN蛋白水平;Western印迹法检测细胞KIM-1蛋白的表达;RT-PCR法检测细胞KIM-1、MCP-1、FN mRNA的表达.结果 与空白对照组相比,高糖组细胞KIM-1蛋白和mRNA的表达于12h时间点增高(P<0.05),48 h时达最高值(P< 0.05);MCP-1及FN蛋白和mRNA的表达于24 h时增多(P<0.05),48 h时达最高值(P<0.05).与高糖组相比,KIM-1siRNA转染组MCP-1及FN蛋白和mRNA表达显著减少(均P<0.05).结论 下调KIM-1的表达能显著抑制高糖条件下肾小管上皮细胞表达MCP-1和FN,提示KIM-1可能通过调控MCP-1及FN的表达参与糖尿病肾病肾间质纤维化(RIF)的进程.