目的 探讨结核分枝杆菌肝素结合血凝素(HBHA)对小鼠骨髓来源巨噬细胞和小鼠巨噬细胞系Raw264.7细胞极化的影响.方法 在应用免疫荧光法确认HBHA进入巨噬细胞的基础上,对小鼠骨髓来源巨噬细胞(BMDM)和 Raw264.7细胞分别施加 LPS(100 ng/ml)+IFN-γ(2.5 ng/ml)、IL-4(20 ng/ml)、不同浓度的 HBHA(1 μg/ml,3 μg/ml, 6 μg/ml,10 μg/ml)和 ESAT-6(5 μg/ml).以ELISA法检测细胞培养上清中细胞因子IL-6、IL-12和TNF-α.通过RT-PCR方法检测M1型极化分子标志诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和TNF-α等,以及M2型极化分子标志精氨酸酶1 (Arg-1)和CD206.最后Western blot检测细胞iNOS和Arg-1蛋白表达水平.结果 结核分枝杆菌HBHA处理BMDM细胞后,培养上清中IL-6、IL-12、TNF-α细胞因子分泌明显增加,iNOS和TNF-α基因表达升高;处理后的Raw264.7细胞中,IL-6分泌量增多,TNF-α表达上调,与ESAT-6对小鼠巨噬细胞的作用结果一致.HBHA和ESAT-6处理小鼠骨髓来源巨噬细胞不能增加M2极化分子标志Arg-1的蛋白表达,但都能诱导小鼠骨髓来源巨噬细胞和Raw264.7细胞iNOS生成增加.结论 结核分枝杆菌HBHA可诱导小鼠巨噬细胞向M1极化.
作者：范琳琳；郑青；杨柳；周磊；李蕊；常亮；郝晓柯；马越云
来源：中华微生物学和免疫学杂志 2017 年 37卷 12期
