目的 探讨腺病毒携带目的基因Cre和Oct4导入新生和成年小鼠转染内耳细胞的可行性,为内耳基因治疗提供可行性研究.方法 采用纳升级显微操作系统,经耳蜗中阶显微注射携带基因编辑基因Cre和绿色荧光蛋白(GFP)基因的5型重组腺病毒悬液于新生鼠(P1)和成年鼠,并以腺病毒携带Oct4基因转染入成年鼠内耳,注射4d后取双侧耳蜗标本做基底膜铺片,观察GFP和Oct4表达情况.结果 新生鼠组:术后第4d见耳蜗底圈62%和中圈54%支持细胞表达GFP.成年鼠组:术后第4天可见耳蜗底圈96%和中圈51%内毛细胞表达GFP,底圈72%和中圈40%支持细胞表达GFP.31%内毛细胞和43%支持细胞表达Oct4.未注射耳未见GFP和Oct4表达.结论 显微注射腺病毒携带目的基因Cre和Oct4可高效导入新生鼠及成年鼠内耳并表达,可用来研究内耳基因功能和基因治疗.
作者:舒易来;陶永;李文妍;陈正一;李华伟
来源:中华细胞与干细胞杂志(电子版) 2016 年 6卷 5期