目的 采用RNA干扰沉默LIMK2基因来抑制细胞骨架的改建,观察流体剪切力作用下其对成骨细胞c-fos基因力学敏感性的影响.方法 对小鼠颅骨分离的成骨细胞分别给予RNA干扰、阴性RNA干扰2种处理后,进行流体剪切力加载或不加载.分别应用逆转录(RT)-PCR和免疫荧光检测c-fos mRNA和蛋白的表达,并进行统计学分析.结果 在无流体剪切力加载条件下,单纯应用RNA干扰方法抑制细胞骨架改建,并不能使成骨细胞c-fos mRNA(0.0108±0.0074与0.0042±0.0018,t=-1.86,P>0.05)和蛋白(121±7与119±6,t=-1.272,P>0.05)的表达升高;流体剪切力能使成骨细胞c-fos mRNA(0.2203±0.1532比0.0042±0.0018,t=-707.35,P<0.05)和蛋白(178±12比119±6,t=-30.761,P<0.05)的表达水平显著升高;RNA干扰处理可显著提高流体剪切力诱导成骨细胞c-fos mRNA(0.5280±0.0879比0.2203±0.1532,t=-1007.00,P<0.05)和蛋白(224±46比178±12,t=-6.853,P<0.05)的表达水平;采用RNA干扰的方法抑制细胞骨架的改建,可以对流体剪切力诱导成骨细胞c-fos mRNA(F=84.388,P<0.05)和蛋白(F=42.409,P<0.05)的表达起协同作用.结论 采用RNA干扰沉默LIMK2基因抑制细胞骨架的改建,可以促进成骨细胞在流体剪切力作用下的c-fos基因表达.

作者：张艺平；覃峰；吴昌敬；李友瑞；陈睿；邵敏峰；付强

来源：中华医学杂志 2009 年 89卷 44期