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目的 探讨微小RNA-21(miR-21)在肺癌化疗耐药中的作用及机制,为非小细胞肺癌多药耐药的逆转提供实验性及理论性依据.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测非小细胞肺癌顺铂敏感细胞株A549及耐药细胞株A549/DDP(原发A549/DDP细胞)中miR-21的表达差异.合成miR-21的干扰序列,以脂质体为载体转染A549/DDP细胞,下调细胞中miR-21表达水平;检测细胞对化疗药物顺铂敏感性的变化;流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡及细胞周期相关指标;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测生存素(Survivin)、周期蛋白D1(Cyclin D1)、表皮生长因子受体(EGFR)、多药耐药相关蛋白(MRP1)和脂蛋白受体相关蛋白(LRP)表达水平.结果 miR-21在原发A549/DDP细胞中表达水平是顺铂敏感细胞株A549的(522.3 ±31.6)%,差异有统计学意义(t=48.318,P<0.01);miR-21表达下调后,A549/DDP细胞对顺铂的敏感性明显增加,半数抑菌浓度(IC5o)降低为(22.2±1.2) μmol/L,转染空载质粒对照组的IC50为(48.6±3.2) μmol/L,差异有统计学意义(t =5.608,P<0.01).与转染空载质粒对照组相比,成功转染A549/DDP细胞组细胞凋亡率为(27.7±1.1)%,显著高于原发A549/DDP细胞的凋亡率(16.8±1.1)%,差异有统计学意义(t=10.183,P<0.01).成功转染A549/DDP细胞组细胞周

作者:任丽;黄琛;柳雅慧;于洋;林丽;文柳静

来源:中华医学杂志 2016 年 96卷 18期

知识库介绍

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作者:
任丽;黄琛;柳雅慧;于洋;林丽;文柳静
来源:
中华医学杂志 2016 年 96卷 18期
标签:
癌,非小细胞肺 抗药性,肿瘤 微RNAs Carcinoma,non-small-cell lung Drugresistance,neoplasm MicroRNAs
目的 探讨微小RNA-21(miR-21)在肺癌化疗耐药中的作用及机制,为非小细胞肺癌多药耐药的逆转提供实验性及理论性依据.方法 通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测非小细胞肺癌顺铂敏感细胞株A549及耐药细胞株A549/DDP(原发A549/DDP细胞)中miR-21的表达差异.合成miR-21的干扰序列,以脂质体为载体转染A549/DDP细胞,下调细胞中miR-21表达水平;检测细胞对化疗药物顺铂敏感性的变化;流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡及细胞周期相关指标;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测生存素(Survivin)、周期蛋白D1(Cyclin D1)、表皮生长因子受体(EGFR)、多药耐药相关蛋白(MRP1)和脂蛋白受体相关蛋白(LRP)表达水平.结果 miR-21在原发A549/DDP细胞中表达水平是顺铂敏感细胞株A549的(522.3 ±31.6)%,差异有统计学意义(t=48.318,P<0.01);miR-21表达下调后,A549/DDP细胞对顺铂的敏感性明显增加,半数抑菌浓度(IC5o)降低为(22.2±1.2) μmol/L,转染空载质粒对照组的IC50为(48.6±3.2) μmol/L,差异有统计学意义(t =5.608,P<0.01).与转染空载质粒对照组相比,成功转染A549/DDP细胞组细胞凋亡率为(27.7±1.1)%,显著高于原发A549/DDP细胞的凋亡率(16.8±1.1)%,差异有统计学意义(t=10.183,P<0.01).成功转染A549/DDP细胞组细胞周