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目的 探讨高机械张力对人髓核细胞的影响及其调控机制.方法 收集手术中取出的非退变的髓核组织(Pfirrmann<Ⅲ级),分离和培养人髓核细胞,在有或无核转录因子κB(NF-κB)的特异性阻断剂(Bay11-7082)预处理的情况下,使用细胞张力加载系统对培养的人髓核细胞加载不同参数的循环机械牵张应力(CMS);搜集细胞培养液,用酶联免疫方法(Elisa)检测炎症因子分泌情况;搜集加载机械牵张应力后的人髓核细胞,用免疫印迹方法检测人髓核细胞NF-κb/兔P65多克隆抗体信号通路变化,用实时聚合酶链反应方法(rt-PCR)和免疫印迹方法检测椎间盘主要退变指标的mRNA和蛋白质水平表达变化;用白细胞介素(IL)-1β刺激人髓核细胞,用细胞免疫荧光检测P65的变化.结果 高振幅(9

作者:王圣杰;孙中仪;柳超;晏鹏;梁鹤;黄凯;王德国;李洋;田纪伟

来源:中华医学杂志 2017 年 97卷 25期

知识库介绍

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作者:
王圣杰;孙中仪;柳超;晏鹏;梁鹤;黄凯;王德国;李洋;田纪伟
来源:
中华医学杂志 2017 年 97卷 25期
标签:
椎间盘 细胞衰老 NF-κB 信号传递 髓核细胞 Intervertebral disk Cell aging NF-κB Signal transduction Nucleus pulposus cells
目的 探讨高机械张力对人髓核细胞的影响及其调控机制.方法 收集手术中取出的非退变的髓核组织(Pfirrmann<Ⅲ级),分离和培养人髓核细胞,在有或无核转录因子κB(NF-κB)的特异性阻断剂(Bay11-7082)预处理的情况下,使用细胞张力加载系统对培养的人髓核细胞加载不同参数的循环机械牵张应力(CMS);搜集细胞培养液,用酶联免疫方法(Elisa)检测炎症因子分泌情况;搜集加载机械牵张应力后的人髓核细胞,用免疫印迹方法检测人髓核细胞NF-κb/兔P65多克隆抗体信号通路变化,用实时聚合酶链反应方法(rt-PCR)和免疫印迹方法检测椎间盘主要退变指标的mRNA和蛋白质水平表达变化;用白细胞介素(IL)-1β刺激人髓核细胞,用细胞免疫荧光检测P65的变化.结果 高振幅(9