目的建立降落(TOUCH DOWN)聚合酶链反应(PCR)方法, 快速检测家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因点突变. 方法设计 LDL-R基因21对引物,根据TOUCH DOWN 原理设计包括启动子和18个外显子特异性片段在内的PCR程序,通过试验选择PCR最佳反应条件,在同一程序中分别对21个片段进行扩增,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,纯化后DNA产物测序分析该方法的特异性.结果编设退火温度范围从68℃降至54℃的PCR程序,优化PCR扩增条件,电泳检测采用同一程序同时分别扩增的LDL-R基因21个片段条带清晰,测序证实了此组片段的特异性.结论成功建立降落PCR方法,提示此法为LDL-R基因突变筛查提供了快速可靠的手段.
作者：王绿娅；曹守春；蔺洁；潘晓冬；杜兰平；刘舒；秦彦文；陈保生
来源：中华检验医学杂志 2003 年 26卷 7期
