目的 建立快速、敏感和特异的检测西尼罗病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR 法,用于西尼罗病毒(WNV)疾病的早期诊断.方法 采用RT-PCR扩增WNV 基因片段,将其克隆至T载体,重组质粒测序并进行同源性分析;阳性质粒用于替代WNV,以阳性质粒为模板,建立SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法,并进行敏感性和特异性检测.结果 经测序证实扩增片段属于WNV,所建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR法可检测到10拷贝的西尼罗病毒RNA,而对其他黄病毒科成员日本脑炎病毒及登革热病毒的检测则为阴性,表明该方法特异.结论 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR 简便快速,具有较高的敏感性和特异性,可以成为一种早期检测西尼罗病毒的新方法.
作者：罗招凡；丁鹤林；刘建伟
来源：中华医院感染学杂志 2007 年 17卷 8期
