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目的 研究Notch信号通路对小细胞肺癌(SCLC)细胞增殖及神经内分泌标志物表达的调控作用.方法 采用包含Notch1胞内段(NIC)的重组质粒转染NCI-H446细胞,并建立稳定转染株.实验细胞分为3组,即NIC转染组、空质粒转染组和未转染组.应用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法,连续6 d测定各组细胞的增殖活性.应用细胞爬片、免疫细胞化学染色法以及Western blot技术,对神经元特异性烯醇化酶(NSE)和嗜铬素蛋白A(CgA)的表达量进行检测.结果 MTT法检测结果 显示,NIC转染组细胞的增殖活性明显降低,其连续6 d测得的吸光度(A)值均小于空质粒转染组和未转染组(均P<0.05).免疫细胞化学染色结果 显示,NIC转染组、空质粒转染组和未转染组cgA染色的阳性单位(Pu)值分别为8.81±0.77、38.10±1.55和38.97±0.80;NSE染色的PU值分别为7.21 ±0.59、28.25±1.46和30.57±1.31;NIC转染组CgA和NSE的Pu值均显著小于空质粒转染组和未转染组(均P<0.01).Westem blot检测结果 显示,NIC转染组、空质粒转染组和未转染组CgA条带的灰度值分别为0.54±0.03、0.99±0.05和1.00;NSE条带的灰度值分别为0.43±0.02、1.07±0.09和1.00;NIC转染组CgA和NSE条带的灰度值均显著小于空质粒转染组和未转染组(均P<0.01).结论 Notch1在SCLC中可能是一种抑癌基因,其介

作者:王洁心;张秀明;王玲玲;程慧;姚根有

来源:中华肿瘤杂志 2009 年 31卷 5期

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作者:
王洁心;张秀明;王玲玲;程慧;姚根有
来源:
中华肿瘤杂志 2009 年 31卷 5期
标签:
Notch1 小细胞肺癌 转染 神经内分泌标志物 细胞增殖 Notch1 Small cell lung cancer Trunsfection Neuroendocrine marker Cell proliferation
目的 研究Notch信号通路对小细胞肺癌(SCLC)细胞增殖及神经内分泌标志物表达的调控作用.方法 采用包含Notch1胞内段(NIC)的重组质粒转染NCI-H446细胞,并建立稳定转染株.实验细胞分为3组,即NIC转染组、空质粒转染组和未转染组.应用二苯基溴化四氮唑蓝(MTT)法,连续6 d测定各组细胞的增殖活性.应用细胞爬片、免疫细胞化学染色法以及Western blot技术,对神经元特异性烯醇化酶(NSE)和嗜铬素蛋白A(CgA)的表达量进行检测.结果 MTT法检测结果 显示,NIC转染组细胞的增殖活性明显降低,其连续6 d测得的吸光度(A)值均小于空质粒转染组和未转染组(均P<0.05).免疫细胞化学染色结果 显示,NIC转染组、空质粒转染组和未转染组cgA染色的阳性单位(Pu)值分别为8.81±0.77、38.10±1.55和38.97±0.80;NSE染色的PU值分别为7.21 ±0.59、28.25±1.46和30.57±1.31;NIC转染组CgA和NSE的Pu值均显著小于空质粒转染组和未转染组(均P<0.01).Westem blot检测结果 显示,NIC转染组、空质粒转染组和未转染组CgA条带的灰度值分别为0.54±0.03、0.99±0.05和1.00;NSE条带的灰度值分别为0.43±0.02、1.07±0.09和1.00;NIC转染组CgA和NSE条带的灰度值均显著小于空质粒转染组和未转染组(均P<0.01).结论 Notch1在SCLC中可能是一种抑癌基因,其介