目的::观察微RNA(miR)-705对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)成骨分化能力的影响。方法:将转染了 miR-705模拟物、抑制物、对照物的MC3T3-E1细胞加入成骨诱导液,在其成骨诱导7 d时采用碱性磷酸酶( ALP)染色检测ALP的活性;在成骨诱导14 d时,用RT-PCR和蛋白质印迹技术检测Runt相关转录因子2( Runx2)和骨钙素( OCN )的 mRNA 及蛋白表达水平;在成骨诱导21 d时,以茜素红染色观察钙结节形成情况并作定量分析。结果:成骨诱导7 d时,模拟物组ALP活性降低,而抑制物组ALP活性升高(均P<0.05);成骨诱导14 d时,模拟物组Runx2和OCN mRNA及蛋白表达水平较对照物组降低,而抑制物组则相反(均P<0.05);成骨诱导21 d时,模拟物组钙结节最小,结节形成量下降,抑制物组钙结节较大且形成量较多(均P<0.05)。结论:miR-705对MC3 T3-E1细胞成骨分化过程具有抑制作用。
作者:杨晓红;杨琨;廖立;金岩
来源:浙江大学学报(医学版) 2016 年 45卷 6期