目的：通过对肺炎链球菌TruB（SpTruB）基因进行原核表达重组质粒的构建，在大肠杆菌中表达SpTruB蛋白，再运用凝胶迁移实验（EMSA）对TruB与tRNA的相互作用进行检测。方法 PCR扩增SpTruB基因序列，然后转入E.coli BL21中进行表达，利用镍离子亲和层析纯化，采用EMSA检测SpTruB与tRNA的相互作用。结果正确构建了SpTruB基因的表达质粒，SpTruB蛋白在E .coli BL21中为可溶性上清表达，成功纯化了目的蛋白，EMSA检测显示SpTruB能与tRNA进行相互作用。结论 SpTruB能与tRNA进行相互作用。
作者：沃铭毅；王青；杨伟
来源：浙江临床医学 2014 年 11期
