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目的 观察Notch1信号途径在食管鳞癌EC9706细胞中的激活状态及其对细胞周期的影响.方法 通过免疫细胞化学检测Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706细胞中的表达,并通过免疫荧光方法 研究Notch1基因在EC9706细胞中的激活状态.并且利用CCK-8试剂检测食管癌细胞的增殖状态.此外,采用RT-PCR和Western blot技术检测与细胞周期相关基因的表达,最后通过流式细胞仪进一步探索激活的Notch1信号途径对细胞周期的影响.结果 转染pcNICD后的食管鳞癌细胞株中发现Notch1基因的表达.免疫荧光结果显示,转染PCNICD后的食管鳞癌细胞株中Notch1信号途径处于激活状态.与未处理和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的生长速率明显受到抑制(P<0.01).此外,与未处理的和转染pcD-NA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的CDK2,cyclin D1和E基因的mRNA和蛋白的表达明显下调(P<0.05).转染pcNICD的EC9706细胞在G_0/G_1期的比率高达74.5

来源:肿瘤防治研究 2009 年 36卷 11期

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肿瘤防治研究 2009 年 36卷 11期
标签:
Notchl信号途径 细胞周期 pcNICD栽体 EC9706细胞 Notch1 signaling pathway Cell cycle pcNICD vector EC9706 cell
目的 观察Notch1信号途径在食管鳞癌EC9706细胞中的激活状态及其对细胞周期的影响.方法 通过免疫细胞化学检测Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706细胞中的表达,并通过免疫荧光方法 研究Notch1基因在EC9706细胞中的激活状态.并且利用CCK-8试剂检测食管癌细胞的增殖状态.此外,采用RT-PCR和Western blot技术检测与细胞周期相关基因的表达,最后通过流式细胞仪进一步探索激活的Notch1信号途径对细胞周期的影响.结果 转染pcNICD后的食管鳞癌细胞株中发现Notch1基因的表达.免疫荧光结果显示,转染PCNICD后的食管鳞癌细胞株中Notch1信号途径处于激活状态.与未处理和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的生长速率明显受到抑制(P<0.01).此外,与未处理的和转染pcD-NA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的CDK2,cyclin D1和E基因的mRNA和蛋白的表达明显下调(P<0.05).转染pcNICD的EC9706细胞在G_0/G_1期的比率高达74.5