目的:研究从白屈菜乙醇提取物中分离出的白屈菜碱在诱导HeLa细胞凋亡中的作用及参与其作用的主要信号转导通路.方法:细胞先以不同浓度白屈菜碱处理48 h,用噻唑蓝法分析确定半数致死量(median lethal dose,LD50).用4 ′,6-二脒基-2-苯基吲哚染色,追踪分析核浓染以及DNA损伤和碎片的形态学变化,并用流式细胞术分析检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生以及细胞周期阻滞和线粒体膜电位的变化.用圆二色光谱分析寻找白屈菜碱和小牛胸腺DNA可能的相互作用.用逆转录聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法测定p38、p53、蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)、磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K)、Janus激酶3(Janus kinase 3,JAK3)、信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)等的mRNA和蛋白表达,以及E6、E7癌基因和促凋亡基因、抗凋亡基因的mRNA 和蛋白表达.结果:根据白屈菜碱的LD50(30 μg/mL),选定3种实验剂量,即22.5、30和37.5 μg/mL.结果显示,白屈菜碱抑制了HeLa细胞增殖,诱发其细胞凋亡,表现为ROS的产生,细胞亚G1和G0/G1周期阻滞,线粒体膜电位变化和DNA碎片产生.圆二色光谱分析结果显示白屈菜碱和小牛胸腺DNA间存在有效的相互作用.信号通路的

作者：Avijit Paul；Kausik Bishayee；Samrat Ghosh；Avinaba Mukherjee；Sourav Sikdar；Debrup Chakraborty；Naoual Boujedaini；Anisur Rahman Khuda-Bukhsh

来源：中西医结合学报 2012 年 10卷 9期