背景与目的:RNA干扰(RNA interference,RNAi)是由双链RNA介导的、在转录后mRNA水平关闭相应基因表达的新基因阻断技术,在基因功能研究、基因治疗方面已显示出巨大的前景.目前,利用RNAi已抑制了包括cyclophilin、GAPDH、p53、c-myc在内的多个内源基因的表达.同时在艾滋病、病毒性肝炎等的治疗研究中也已取得一定进展.但对肝癌等恶性肿瘤中高表达的hTERT基因,国内外还未见相关研究报道.本研究利用RNAi技术,在体内外抑制hTERT基因表达,探讨RNAi对肝癌治疗的可行性.方法:设计干扰hTERT基因的小片段RNA,构建重组表达质粒pTZU6+1-shRNA-hTERT并导入肝癌SMMC7721细胞株和裸鼠移植瘤,在体内外诱导RNAi,采用流式细胞检测技术、RT-PCR法、免疫组化等同时检测RNAi治疗组和对照组hTERT基因表达及细胞增殖变化.结果:体外细胞实验显示,重组质粒pTZU6+1-shRNA-hTERT导入肝癌SMMC7721细胞株3~7天后,肝癌细胞生长抑制率达37.5
作者:张鹏辉;涂植光;杨明清;黄文方;邹琳;周亚莉
来源:癌症 2004 年 23卷 6期