目的 研究海绵来源三萜类化合物Stellettin B(Stel B)诱导人恶性胶质瘤SF295细胞发生自噬的作用,并对其作用机理进行初步探讨.方法 采用WST-8法研究Stel B对SF295细胞的增殖抑制活性;通过多种实验技术,包括单丹磺酰戊二胺(MDC)染色、蛋白质印迹(Western Blot)以及单体红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(mRFP-GFP-LC3)质粒转染,评价Stel B是否具有诱导细胞发生自噬的作用;采用Western Blot研究Stel B对SF295细胞中磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路的相关分子表达或磷酸化水平的影响;通过WST-8法检测应用自噬抑制剂氯喹抑制自噬作用后,Stel B抗肿瘤活性的变化.结果 Stel B能显著抑制SF295细胞的增殖,且具有剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为0.026μmol/L.MDC染色和Western Blot结果显示,经Stel B作用后,SF295细胞内出现大量自噬小体,自噬标志性蛋白LC3B-Ⅱ的表达量增加.激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示,Stel B能诱导SF295细胞发生自噬并阻滞自噬体与溶酶体相融合.Western Blot结果还显示,Stel B可抑制SF295细胞中PI3K催化亚基p110(PI3K-p110)蛋白的表达,并降低Akt和mTOR的磷酸化水平.利用自噬抑制剂氯喹阻断自噬后,Stel B对SF295细胞的增殖抑制作用

作者：周畅；张倩；彭鑫；王铮铭；刘瑶；张哲；王冉；孔德新

来源：国际生物医学工程杂志 2018 年 41卷 2期