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目的:探讨微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及其分子机制.方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测膀胱癌组织、癌旁正常组织以及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1、膀胱癌细胞5637中miR-130a-3p和细胞外基质蛋白多糖(SPOCK1)mRNA及蛋白的表达.取5637细胞,分别转染miR-130a-3p mimics或si-SPOCK1,同时设阴性对照和空白对照,用MTT法检测细胞存活,Transwell小室法测定细胞侵袭和迁移,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot法检测MMP-2和Caspase-3蛋白的表达;用生物学信息预测和双荧光素酶报告实验分析miR-130a-3p和SPOCK1的靶向关系.结果:与癌旁组织和SV-HUC-1细胞相比,膀胱癌组织和细胞中miR-130a-3p的表达下调,SPOCK1 mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05).转染miR-130a-3p或沉默SPOCK1均可抑制膀胱癌细胞存活、侵袭和迁移,诱导其凋亡,并抑制MMP-2蛋白表达,促进Caspase-3蛋白表达(P<0.05).经验证SPOCK1是miR-130a-3p的靶基因.结论:miR-130a-3p可能通过靶向调控SPOCK1的表达来抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移,诱导其凋亡.

作者:宋歌;董彪;朱照伟

来源:郑州大学学报(医学版) 2020 年 55卷 4期

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作者:
宋歌;董彪;朱照伟
来源:
郑州大学学报(医学版) 2020 年 55卷 4期
标签:
膀胱癌 凋亡 miR-130a-3p SPOCK1
目的:探讨微小RNA-130a-3p(miR-130a-3p)对膀胱癌细胞侵袭、迁移和凋亡的影响及其分子机制.方法:采用qRT-PCR和Western blot法检测膀胱癌组织、癌旁正常组织以及人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1、膀胱癌细胞5637中miR-130a-3p和细胞外基质蛋白多糖(SPOCK1)mRNA及蛋白的表达.取5637细胞,分别转染miR-130a-3p mimics或si-SPOCK1,同时设阴性对照和空白对照,用MTT法检测细胞存活,Transwell小室法测定细胞侵袭和迁移,AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,Western blot法检测MMP-2和Caspase-3蛋白的表达;用生物学信息预测和双荧光素酶报告实验分析miR-130a-3p和SPOCK1的靶向关系.结果:与癌旁组织和SV-HUC-1细胞相比,膀胱癌组织和细胞中miR-130a-3p的表达下调,SPOCK1 mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05).转染miR-130a-3p或沉默SPOCK1均可抑制膀胱癌细胞存活、侵袭和迁移,诱导其凋亡,并抑制MMP-2蛋白表达,促进Caspase-3蛋白表达(P<0.05).经验证SPOCK1是miR-130a-3p的靶基因.结论:miR-130a-3p可能通过靶向调控SPOCK1的表达来抑制膀胱癌细胞侵袭、迁移,诱导其凋亡.