目的 观察生存素(survivin)基因干扰对SW480细胞增殖的影响,探讨其干扰对hTERT基因表达的影响及机制.方法 构建携带survivin小发夹干扰RNA的重组表达载体pGenesil-1.1-survivin,转染结肠癌SW480细胞,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞增殖周期;荧光定量PCR和Western blot检测survivin、h TERT和Sp1的mRNA和蛋白表达,TRAP-ELISE法检测端粒酶活性.构建靶向Sp1基因的RNA干扰载体转染SW480细胞,检测hTERT基因mRNA和蛋白水平及端粒酶活性.结果 Survivin基因干扰后,SW480细胞增殖受到明显抑制,增殖抑制率为34.44％ (P ＜0.05),G0/G1期细胞增加,S期和G2/M期细胞减少(P＜0.01).hTERT和Sp1基因的mRNA和蛋白表达水平显著降低,端粒酶活性降低(P＜0.01).Sp1基因干扰后,hTERT基因的mRNA和蛋白表达水平及端粒酶活性下降(P＜0.01).结论 靶向沉默survivin基因对SW480细胞增殖有明显的抑制作用;同时下调hTERT基因表达,其机制可能与Sp1基因表达下调有关.
作者：王平；肖琳；董俊红；李桂枝；赵春玲；王守训
来源：基础医学与临床 2013 年 33卷 12期
