目的 探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对人肾小球系膜细胞(HMCs) IP3R1蛋白和mRNA表达的影响及PKC在此信号通路中的作用,以期为肝肾综合征(HRS)肾小球滤过虑下降的发生机制和防治思路提供理论依据.方法 用实时定量PCR和免疫印记法检测IP3R1 mRNA和蛋白表达的情况,并分别用PMA耗竭内源性蛋白激酶C(PKC),PKCα特异性抑制剂Safingol和PKCδ特异性抑制剂Rottlerin及HA-DN-PKCα质粒转染干预上述诱导实验.同时,用免疫印记法检测TNFα对PKCα和p-PKCα表达的影响.用非放射性测活检测TNFα对PKCα的活化及抑制剂对PKCα活化的影响.结果 TNFα作用HMCs后,IP3R1蛋白和mRNA表达均明显增加.PMA,PKCα抑制剂Safingol,HA-DN-PKCα质粒转染均能明显阻断TNFα诱导的IP3R1蛋白的上调,而PKCδ抑制剂Rottlerin无明显阻断作用.TNFα刺激HMCs,各不同时间组总PKCα蛋白表达无明显差异,而TNFα刺激8h p-PKCα蛋白表达明增加.此外,非放射性测活表明TNFα活化PKCα,Safingol可阻断PKCα的活化.结论 TNFα能上调HMCs中IP3R1蛋白及IP3R1mRNA的表达.活化的PKCα在TNFα上调IP3R1的表达中起重要作用.
作者：王育蓉；章欢；孙辉；刘沛
来源：临床消化病杂志 2013 年 25卷 2期
