目的 探讨免疫检查点程序性死亡受体-1(PD-1)/PDL1通路在脑型疟(CM)中的作用,研究人为强化CD8+T细胞PD-1/PDL1通路对小鼠CM模型的保护性作用.方法 建立小鼠实验型脑型疟(ECM)模型,对其脑组织切片进行HE染色和免疫荧光染色,评价ECM小鼠脑部病理变化;分离ECM小鼠脾脏CD8+T细胞,流式细胞术检测其PD-1分子表达,评价脾脏CD8+T细胞活化情况;对ECM小鼠脾脏CD8+T细胞进行羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)染色,评价其增殖情况;分离小鼠原代脑血管内皮细胞(BMECs),添加γ干扰素(IFN-γ)和感染疟原虫的红细胞活化BMECs,建立CD8+T细胞-BMECs共孵育模型,模拟ECM小鼠脑部免疫微环境,使用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验评价活化的脾脏CD8+T细胞对BMECs的杀伤效果;利用CD8+T细胞-BMECs共孵育模型和小鼠脑组织切片免疫荧光实验,检测BMECs、小胶质细胞、星形胶质细胞的PDL1表达情况;体外表达具有生物学活性的PDL1-IgG1Fc融合蛋白和IgG1Fc对照蛋白;使用PDL1-IgG1Fc融合蛋白干预ECM小鼠,通过记录小鼠存活时间、检测血清细胞因子含量、以及CD8+T细胞-BMECs共孵育模型,评价PDL1-IgG1Fc融合蛋白降低CD8+T细胞过度活化状态,降低脑型疟症状的作用.结果 ECM小鼠脑部血脑屏障开放,CD8+T细胞浸润至脑实质,且部分CD8+T细胞与神经元存在"
作者：王旭；张宁宁；沈燕；赵晓庆；梁姣；王军
来源：热带医学杂志 2022 年 22卷 3期
