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目的 探讨miR-1721靶向抑制CD44的表达及对前列腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 构建CD44 mRNA 3'-非翻译区(3'-UTR)的荧光素酶报告载体系统,通过荧光素酶系统确定miR-1721对CD44 mRNA3'-UTR的靶向关系;脂质体转染法将miR-1721模拟物转入前列腺癌PC-3细胞中,Western印迹法检测转染后CD44蛋白表达水平的改变;MTT法检测miR-1721 mimics对PC-3细胞增殖能力的影响,Transwell小室法检测其对肿瘤细胞袭侵袭能力的影响;通过干细胞成球实验检测miR-1721 mimics对前列腺癌干细胞样微球体形成的影响.结果 miR-1721能特异性地与CD44 mRNA 3'-UTR结合,抑制其荧光素酶的活性,干细胞标记基因CD44是miR-1721的靶基因.过表达miR-1721的PC-3细胞中CD44蛋白表达水平明显降低,可显著抑制PC-3细胞的侵袭能力,同时过表达CD44可负调控miR-1721对PC-3细胞增殖和侵袭能力的影响;干细胞成球实验证实,miR-1721能显著抑制前列腺癌细胞PC-3干细胞的微球体形成能力.结论 miR-1721通过靶向调控CD44的表达而抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭能力及干细胞的形成能力.

作者:杨波;温晓飞;刘辉;刘峰;邓晓俊;廖国强

来源:同济大学学报(医学版) 2016 年 37卷 4期

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作者:
杨波;温晓飞;刘辉;刘峰;邓晓俊;廖国强
来源:
同济大学学报(医学版) 2016 年 37卷 4期
标签:
前列腺肿瘤 CD44 干细胞标记基因 miRNAs prostate carcinoma CD44 stem cell genetic marker miRNAs
目的 探讨miR-1721靶向抑制CD44的表达及对前列腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 构建CD44 mRNA 3'-非翻译区(3'-UTR)的荧光素酶报告载体系统,通过荧光素酶系统确定miR-1721对CD44 mRNA3'-UTR的靶向关系;脂质体转染法将miR-1721模拟物转入前列腺癌PC-3细胞中,Western印迹法检测转染后CD44蛋白表达水平的改变;MTT法检测miR-1721 mimics对PC-3细胞增殖能力的影响,Transwell小室法检测其对肿瘤细胞袭侵袭能力的影响;通过干细胞成球实验检测miR-1721 mimics对前列腺癌干细胞样微球体形成的影响.结果 miR-1721能特异性地与CD44 mRNA 3'-UTR结合,抑制其荧光素酶的活性,干细胞标记基因CD44是miR-1721的靶基因.过表达miR-1721的PC-3细胞中CD44蛋白表达水平明显降低,可显著抑制PC-3细胞的侵袭能力,同时过表达CD44可负调控miR-1721对PC-3细胞增殖和侵袭能力的影响;干细胞成球实验证实,miR-1721能显著抑制前列腺癌细胞PC-3干细胞的微球体形成能力.结论 miR-1721通过靶向调控CD44的表达而抑制前列腺癌细胞增殖、侵袭能力及干细胞的形成能力.