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目的 探讨地氟醚预处理对缺氧/复氧(A/R)损伤ECV304细胞NF-κB活性的影响.方法 选用ECV304细胞株.实验分为两部分:(1)将细胞分为空白对照组及TNF-α不同持续时间刺激组共6组,用Western blot法分析NF-κB的抑制因子IκB蛋白的降解和磷酸化.(2)将细胞分为5组,即空白对照组(Ⅰ组)、A/R组(Ⅱ组)、A/R+TNF-α 10 ng/mL刺激组(Ⅲ组)、地氟醚1.0 MAC预处理+A/R组(Ⅳ组)和地氟醚1.0 MAC预处理+A/R+TNF-α 10 ng/mL刺激组(Ⅴ组).用间接免疫荧光法检测各组细胞NF-κB/p65亚基的定位.结果 TNF-α刺激ECV304细胞后, IκB-α蛋白降解的时间高峰为30 min,而IκB-α磷酸化的时间高峰为1 h.A/R损伤可激活ECV304细胞中NF-κB的活性,而经1.0 MAC地氟醚预处理后,由TNF-α激活的上述变化可受到抑制.免疫荧光分析显示, TNF-α刺激可使NF-κB/p65荧光标记由胞浆区转入胞核区,而经地氟醚预处理后, NF-κB/p65入核明显减少.结论 抑制NF-κB的激活可能是地氟醚预处理减少ECV304细胞缺氧/复氧损伤的机制之一.

作者:李渊;张小楠;朱彪;薛张纲

来源:复旦学报(医学版) 2007 年 34卷 6期

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作者:
李渊;张小楠;朱彪;薛张纲
来源:
复旦学报(医学版) 2007 年 34卷 6期
标签:
地氟醚 缺氧/复氧损伤 NF-κB TNF-α
目的 探讨地氟醚预处理对缺氧/复氧(A/R)损伤ECV304细胞NF-κB活性的影响.方法 选用ECV304细胞株.实验分为两部分:(1)将细胞分为空白对照组及TNF-α不同持续时间刺激组共6组,用Western blot法分析NF-κB的抑制因子IκB蛋白的降解和磷酸化.(2)将细胞分为5组,即空白对照组(Ⅰ组)、A/R组(Ⅱ组)、A/R+TNF-α 10 ng/mL刺激组(Ⅲ组)、地氟醚1.0 MAC预处理+A/R组(Ⅳ组)和地氟醚1.0 MAC预处理+A/R+TNF-α 10 ng/mL刺激组(Ⅴ组).用间接免疫荧光法检测各组细胞NF-κB/p65亚基的定位.结果 TNF-α刺激ECV304细胞后, IκB-α蛋白降解的时间高峰为30 min,而IκB-α磷酸化的时间高峰为1 h.A/R损伤可激活ECV304细胞中NF-κB的活性,而经1.0 MAC地氟醚预处理后,由TNF-α激活的上述变化可受到抑制.免疫荧光分析显示, TNF-α刺激可使NF-κB/p65荧光标记由胞浆区转入胞核区,而经地氟醚预处理后, NF-κB/p65入核明显减少.结论 抑制NF-κB的激活可能是地氟醚预处理减少ECV304细胞缺氧/复氧损伤的机制之一.