人apoA-I分泌型表达调控细胞模型构建-临床诊疗知识库

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作者：

孟葆林；李维琪；毛建平；曹旭

来源：

中国生物工程杂志 2005 年 25卷 8期

标签：

载脂蛋白A-I apoA-I启动子增强型绿色荧光蛋白人肝癌细胞HepG2 稳定转染克隆

分别从pMD18-T质粒和人基因组DNA扩增出人apoA-I CDS区序列和apoA-I启动子(702bp片段),与pEGFP-N1重组,构成受apoA-I启动子调控的pEGFP-N1质粒和融合蛋白表达质粒,分别转染人肝癌HepG2细胞,以绿色荧光为标志筛选稳定转染系列克隆.用RT-PCR、荧光显微镜、免疫荧光术等鉴定其中一个克隆融合蛋白的表达;分别以胰岛素和葡萄糖刺激物鉴定该克隆的外源apoA-I启动子调控.结果表明:人apoA-I分泌型表达调控肝细胞模型初步建成.

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