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采用克隆基因测序技术,从荧光假单胞菌GcM5-1A基因组文库中筛选到了天冬氨酸转氨酶的编码基因aspC.通过聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因,插入pET-15b构建重组表达质粒pET-15bAAT,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导天冬氨酸转氨酶在大肠杆菌中高效表达,利用亲和层析法初步分离纯化了重组蛋白.生物活性分析表明,纯化的重组天门冬氨酸转氨酶具有氨基转移活性.

作者:邵楠;王虹;李荣贵

来源:中国生物工程杂志 2009 年 29卷 4期

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邵楠;王虹;李荣贵
来源:
中国生物工程杂志 2009 年 29卷 4期
标签:
荧光假单胞菌GcM5-1A 天冬氨酸转氨酶 基因克隆 表达 纯化
采用克隆基因测序技术,从荧光假单胞菌GcM5-1A基因组文库中筛选到了天冬氨酸转氨酶的编码基因aspC.通过聚合酶链式反应(PCR)扩增目的基因,插入pET-15b构建重组表达质粒pET-15bAAT,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导天冬氨酸转氨酶在大肠杆菌中高效表达,利用亲和层析法初步分离纯化了重组蛋白.生物活性分析表明,纯化的重组天门冬氨酸转氨酶具有氨基转移活性.