目的:克隆人类Ubc9基因cDNA全长,构建Ubc9的真核表达载体并表达.方法:采用RT-PCR技术从人小细胞肺癌NCI-H446细胞总RNA中扩增Ubc9 cDNA基因片段,经过酶切鉴定后,克隆至pUCM-T载体,测序证实碱基序列无误后,再克隆至真核绿色荧光蛋白表达载体(pEGFP-N1)上,并转染到真核细胞,观察其在真核细胞中的表达.结果:测序证实克隆的Ubc9全长cDNA阅读框正确完整,酶切和序列测定证实Ubc9正确插入pEGFP-N1载体中,该重组载体能够在真核细胞中表达.结论:成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-Ubc9.
作者：李慧；彭扬；牛慧彦；何平
来源：现代肿瘤医学 2011 年 19卷 5期
