目的：探讨甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-aza-2-deoxycyfidine，5-Aza-dC）对大鼠膝关节纤维化中肌成纤维细胞增殖的影响。方法：膝关节固定法建立大鼠膝关节纤维化模型，取膝关节后关节囊，组织块培养法分离培养肌成纤维细胞。采用免疫荧光技术完成肌成纤维细胞的鉴定。用终浓度为2μmol/L 5-Aza-dC 处理肌成纤维细胞，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测肌成纤维细胞增殖变化。应用Quantitative Real-Time PCR 和蛋白质印迹法检测经5-Aza-dC 处理前后肌成纤维细胞中α-SMA、col1A1 mRNA和蛋白的表达情况。流式细胞术检测肌成纤维细胞周期的变化。结果：大鼠膝关节纤维化模型中膝关节伸直角度明显减少。细胞免疫荧光观察到从纤维化模型中分离培养的细胞大量表达标志性的α-SMA蛋白。5-Aza-dC处理肌成纤维细胞后，α-SMA、col1A1 mRNA及蛋白表达明显降低；5-Aza-dC处理组的肌成纤维细胞活化增殖受到明显抑制。结论：甲基转移酶抑制剂5-Aza-dC可能通过抑制肌成纤维细胞活化增殖而成为潜在的膝关节纤维化治疗药物。
作者：王昊；王昆
来源：实用医学杂志 2014 年 10期
