您的账号已在其他设备登录,您当前账号已强迫下线,
如非您本人操作,建议您在会员中心进行密码修改

确定
收藏 | 浏览130 | 下载47

目的 探讨miR-330-3p靶向丙酮酸激酶M2型(PKM2)基因对胃癌细胞增殖、凋亡及有氧糖酵解进程的影响及机制.方法 采用反转录聚合酶链式反应检测胃癌细胞SGC-7901、胃粘膜上皮细胞GES-1 miR-miR-330-3p表达水平,将miR-NC、miR-330-3p-inhibitor、miR-330-3p-mimcs、miR-330-3p-inhibitor+PKM2-NC、miR-330-3p-inhibitor+PKM2-shRNA、miR-330-3p-mimcs+LV-NC、miR-330-3p-mimcs+LV-PKM2转染至胃癌细胞中,采用CCK8法、Transwell实验、Annexin V/PI法分别检测细胞增殖、侵袭、凋亡情况,检测葡萄糖利用率、乳酸生成量、己糖激酶(HK)活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性等糖酵解指标,采用Western Blot法检测PKM2、GLUT1、HK2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,采用双荧光素酶报告基因检测实验检测miR-330-3p与PKM2的靶向关系.结果(1)胃癌细胞系miR-330-3p表达量高于胃粘膜上皮细胞,PKM2表达量低于胃粘膜上皮细胞(P<0.05).(2)生物信息学显示,miR-330-3p与PKM2存在结合位点;荧光素酶报告基因检测结果显示,与miR-NC组比较,miR-330-3p PKM2野生型荧光素酶活性降低(P<0.05).(3)与miR-NC组比较,miR-330-3p-inhibitor组吸光度值、侵袭细胞数增多,凋亡细胞数减少,细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量、HK活性、LDH活性降低,PKM2、GLUT1、HK2表达

作者:刘磊;赵羲和;田忠

来源:实用医学杂志 2021 年 37卷 9期

知识库介绍

临床诊疗知识库该平台旨在解决临床医护人员在学习、工作中对医学信息的需求,方便快速、便捷的获取实用的医学信息,辅助临床决策参考。该库包含疾病、药品、检查、指南规范、病例文献及循证文献等多种丰富权威的临床资源。

详细介绍
热门关注
免责声明:本知识库提供的有关内容等信息仅供学习参考,不代替医生的诊断和医嘱。

收藏
| 浏览:130 | 下载:47
作者:
刘磊;赵羲和;田忠
来源:
实用医学杂志 2021 年 37卷 9期
标签:
miR-330-3p 丙酮酸激酶M2型 胃癌 糖酵解 增殖 凋亡
目的 探讨miR-330-3p靶向丙酮酸激酶M2型(PKM2)基因对胃癌细胞增殖、凋亡及有氧糖酵解进程的影响及机制.方法 采用反转录聚合酶链式反应检测胃癌细胞SGC-7901、胃粘膜上皮细胞GES-1 miR-miR-330-3p表达水平,将miR-NC、miR-330-3p-inhibitor、miR-330-3p-mimcs、miR-330-3p-inhibitor+PKM2-NC、miR-330-3p-inhibitor+PKM2-shRNA、miR-330-3p-mimcs+LV-NC、miR-330-3p-mimcs+LV-PKM2转染至胃癌细胞中,采用CCK8法、Transwell实验、Annexin V/PI法分别检测细胞增殖、侵袭、凋亡情况,检测葡萄糖利用率、乳酸生成量、己糖激酶(HK)活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性等糖酵解指标,采用Western Blot法检测PKM2、GLUT1、HK2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,采用双荧光素酶报告基因检测实验检测miR-330-3p与PKM2的靶向关系.结果(1)胃癌细胞系miR-330-3p表达量高于胃粘膜上皮细胞,PKM2表达量低于胃粘膜上皮细胞(P<0.05).(2)生物信息学显示,miR-330-3p与PKM2存在结合位点;荧光素酶报告基因检测结果显示,与miR-NC组比较,miR-330-3p PKM2野生型荧光素酶活性降低(P<0.05).(3)与miR-NC组比较,miR-330-3p-inhibitor组吸光度值、侵袭细胞数增多,凋亡细胞数减少,细胞葡萄糖消耗量、乳酸生成量、HK活性、LDH活性降低,PKM2、GLUT1、HK2表达