目的 克隆人硫氧还蛋白(hTRX)基因,并构建含有该目的基因的重组逆转录病毒载体.方法 利用RT-PCR法,以PHA活化的人外周血单个核细胞总RNA为模板,扩增hRX编码蛋白的cDNA基因,并亚克隆至逆转录病毒载体pSIV-1中进行PCR、双酶切和测序鉴定.结果 将所得的序列与GenBank(BC00377)报道的序列比较,其酶活性中心(Trp-Cy8-Gly-Pro-Cys)与已知序列一致,第132、136、170、264位碱基与已知序列不同,其中第136、170位相应密码子编码的氨基酸发生了变化(Phe→Leu,Ile→Thr),成功获得了pSIV-1-hTRX重组逆转录病毒载体.结论 hTRX基因的克隆及其重组逆转录病毒载体pSIV-1-hTRX的构建,为进一步探讨hTRX的生物学活性和应用奠定了基础.
作者：谢宇锋；盛伟华；缪竞诚；杨吉成
来源：苏州大学学报（医学版） 2007 年 27卷 1期
