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热休克蛋白gp96是热休克蛋白90家族成员,能够引起非特异性和特异性免疫反应.得到大量高纯度的蛋白质是研究开发gp96的关键.然而重组的gp96容易在E.coli中降解,并在一定条件下形成多聚体.实验先将人gp96基因克隆到pET-30a载体上并在E.coli Blstar中表达,再经过亲和层析、阴离子交换、分子筛分别纯化gp96.最终去掉了大部分的降解片段和多聚体,得到一定量的可溶性gp96,为进一步研究其结构和功能打下一定的基础.

作者:阿丽娅;李宏涛;周明海;哈斯;田波

来源:微生物学报 2004 年 44卷 6期

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阿丽娅;李宏涛;周明海;哈斯;田波
来源:
微生物学报 2004 年 44卷 6期
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热休克蛋白 gp96 克隆 表达 纯化
热休克蛋白gp96是热休克蛋白90家族成员,能够引起非特异性和特异性免疫反应.得到大量高纯度的蛋白质是研究开发gp96的关键.然而重组的gp96容易在E.coli中降解,并在一定条件下形成多聚体.实验先将人gp96基因克隆到pET-30a载体上并在E.coli Blstar中表达,再经过亲和层析、阴离子交换、分子筛分别纯化gp96.最终去掉了大部分的降解片段和多聚体,得到一定量的可溶性gp96,为进一步研究其结构和功能打下一定的基础.