利用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析(DEAE-22)、Sephadex G-75凝胶过滤从嗜热脂肪芽孢杆菌胞内提纯得B半乳糖甘酶。研究表明，该酶最适表观反应曙度和最适PH分别为60OCT 6.4D 50OC该酶具有良好的热稳定性.碱金属和碱土金属盐对酶有激活作用,重金属Zn2+、Fe3+、Cu2+抑制梅的活力。巯基保护剂能明显增强酶的活力，而巯基结合试剂强烈抑制酶的活性。应酶对B-D糖甘键具有高度专一性，与糖苷键相连的配基对酶活力也有很大影响。在55OC，酶作用于底物ONPG和乳糖的米氏常数Km分别2.63mmol/L和4.93mmol/L,最大反应速度分别为1.93×
10-5mmol.min-1.mg-1protein和6.54×10-5mmol.min-1.mg-1protein.乳糖的水解产物葡萄糖抑制常数2.47mmol/L，但半乳糖没有这种效应。另外，该酶具有转半乳糖苷的活力，在水解乳糖过程中，生成包括三、四糖的半乳糖低聚糖。
作者：魏东芝；陈少欣；王筱兰；袁勤生；俞俊棠
来源：微生物学通报 2001 年 1期
