[目的]研究芽孢杆菌(Bacillus sp.) P38中乳酸脱氢酶对其产高光学纯L-乳酸(光学纯度＞99％)的影响.[方法]全基因组测序显示在该菌中存在3个乳酸代谢关键酶,分别为L-乳酸脱氢酶(L-LDH)、D-乳酸脱氢酶(D-LDH)和苹果酸或L-乳酸脱氢酶(M/L-LDH).通过将这3个酶进行异源表达、纯化与酶学特性分析,结合Native-PAGE、实时荧光定量PCR等方法,初步确定该菌高产光学纯L-乳酸的机理.[结果]Bacillus sp.P38中L-LDH对丙酮酸的催化活性(Kcat/Km值)最高,分别是D-LDH的2.9倍和M/L-LDH的4.3倍.其中M/L-LDH主要起L-LDH的功能.Native-PAGE实验中未检测到D-LDH活性.Bacillus sp.P38所有发酵阶段ldhL的转录水平均高于ldhD和ldhM/L.[结论]L-LDH是Bacillus sp.P38产高光学纯L-乳酸的主要关键酶.
作者：孙丽璠；朱凌峰；侯剑峰；王艳萍
来源：微生物学通报 2015 年 42卷 8期
