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目的: 研究补体C3d中P28分子对HBV基因免疫诱导的细胞免疫应答的调节作用, 为增强基因疫苗细胞免疫的效果寻求新方法.方法: 分别分离获取C3d-P28和HBV-preS2/S编码基因, 并克隆入真核表达载体pVAON33中, 构建相应重组质粒pVAON33-S2/S(仅含HBV-preS2/S编码基因)和pVAON33-S2/S-P28.4(含HBV-preS2/S和4拷贝C3d-P28的编码基因), 并以PCR、酶切和DNA序列测定进行鉴定. 以肌肉注射法对BALB/c小鼠实施3次基因免疫(100 μg/100 μL*只), 间隔3 wk, 并以空质粒免疫小鼠作为对照.免疫小鼠脾细胞体外经HBsAg刺激后, 用3H-TdR掺入法和同位素释放法, 分别检测特异性淋巴细胞增殖和CTL杀伤活性.结果: pVAON33-S2/S和pVAON33-S2/S-P28.4免疫小鼠的脾细胞, 均显示较强的特异性增殖活性和CTL杀伤活性, 但后者显著强于前者(P<0.05). 结论: C3d-P28可增强HBV-preS2/S基因免疫诱导的特异性细胞免疫应答.

作者:王立新;徐薇;关庆东;熊思东

来源:细胞与分子免疫学杂志 2003 年 19卷 3期

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作者:
王立新;徐薇;关庆东;熊思东
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2003 年 19卷 3期
标签:
基因免疫 细胞免疫应答 补体C3d 乙型肝炎病毒表面抗原
目的: 研究补体C3d中P28分子对HBV基因免疫诱导的细胞免疫应答的调节作用, 为增强基因疫苗细胞免疫的效果寻求新方法.方法: 分别分离获取C3d-P28和HBV-preS2/S编码基因, 并克隆入真核表达载体pVAON33中, 构建相应重组质粒pVAON33-S2/S(仅含HBV-preS2/S编码基因)和pVAON33-S2/S-P28.4(含HBV-preS2/S和4拷贝C3d-P28的编码基因), 并以PCR、酶切和DNA序列测定进行鉴定. 以肌肉注射法对BALB/c小鼠实施3次基因免疫(100 μg/100 μL*只), 间隔3 wk, 并以空质粒免疫小鼠作为对照.免疫小鼠脾细胞体外经HBsAg刺激后, 用3H-TdR掺入法和同位素释放法, 分别检测特异性淋巴细胞增殖和CTL杀伤活性.结果: pVAON33-S2/S和pVAON33-S2/S-P28.4免疫小鼠的脾细胞, 均显示较强的特异性增殖活性和CTL杀伤活性, 但后者显著强于前者(P<0.05). 结论: C3d-P28可增强HBV-preS2/S基因免疫诱导的特异性细胞免疫应答.