目的观察补体C3d-P28对基因免疫的调节作用及其不同拷贝数对调节作用的影响,为增强基因免疫效果寻求新方法. 方法 PCR法获得补体C3d-P28编码基因并以头尾串连方式将1～4拷贝C3d-P28编码基因克隆至pVAON33,构建pVAON33-P28.[1～4]重组质粒,然后将HBV-preS2/S编码基因分别插入pVAON33和pVAON33-P28.[1～4]质粒获得pVAON33-S2/S和pVAON33-S2/S-P28.[1～4]重组质粒.肌肉注射各重组质粒DNA(每只100μg/100μl)初次免疫小鼠,并以pVAON33为对照;12周后皮下注射HBsAg蛋白加强免疫各组小鼠,ELISA法检测免疫小鼠血清特异性抗-HBs-IgG. 结果 pVAON33-S2/S重组质粒免疫小鼠可诱导产生特异性抗-HBs-IgG,含不同拷贝C3d-P28编码基因的重组质粒可诱导更高的特异性抗体,其中pVAON33-S2/S-P28.4重组质粒诱导的抗体水平最高(P＜0.01).蛋白加强免疫后,含C3d-P28编码基因重组质粒免疫组抗-HBs-IgG迅速上升,并明显高于pVAON33-S2/S重组质粒免疫组(P＜0.05),pVAON33-S2/S-P28.4重组质粒诱导的抗体仍维持最高水平. 结论不同拷贝的C3d-P28能不同程度地增强HBV-preS2/S基因免疫诱导的特异性体液免疫及其蛋白加强后的回忆反应,其中4拷贝C3d-P28的增强作用较为显著.
作者：王立新；徐薇；关庆东；熊思东
来源：中华微生物学和免疫学杂志 2003 年 23卷 6期
