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目的 探讨p38δ对HeLa细胞顺铂敏感性的影响.方法 采用细胞转染方法在HeLa细胞中过表达p388蛋白;采用Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡水平;采用蛋白质印迹法检测蛋白表达水平;采用免疫沉淀法纯化p38δ蛋白,并采用蛋白质印迹法检测其磷酸化水平.结果 与转染对照质粒HeLa细胞相比,转染p38δ表达质粒HeLa细胞在正常培养条件下和顺铂处理条件下的细胞凋亡水平都显著上升(P均<0.01).在顺铂处理条件下,与转染对照质粒HeLa细胞相比,转染p38δ表达质粒HeLa细胞Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax和p53蛋白表达水平上升(P均<0.01).顺铂处理HeLa细胞中p38δ磷酸化水平显著上升(P<0.01).与转染野生型p38δ(WT)HeLa细胞相比,转染激酶失活突变体p38δ(K54R) HeLa细胞在正常培养条件下和顺铂处理条件下的细胞凋亡水平都显著下降(P均<0.01).结论 p38δ促进HeLa细胞凋亡并增强其对顺铂的敏感性,且p38δ对HeLa细胞凋亡的调控依赖于其蛋白激酶活性.

作者:沈祥丽;张勇;柳怡;张勇武

来源:西部医学 2018 年 30卷 5期

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作者:
沈祥丽;张勇;柳怡;张勇武
来源:
西部医学 2018 年 30卷 5期
标签:
HeLa细胞 p38δ 细胞凋亡 顺铂 蛋白激酶 HeLa cells p38δ Cell apoptosis Cisplatin Protein kinase
目的 探讨p38δ对HeLa细胞顺铂敏感性的影响.方法 采用细胞转染方法在HeLa细胞中过表达p388蛋白;采用Annexin V-FITC/PI双染色检测细胞凋亡水平;采用蛋白质印迹法检测蛋白表达水平;采用免疫沉淀法纯化p38δ蛋白,并采用蛋白质印迹法检测其磷酸化水平.结果 与转染对照质粒HeLa细胞相比,转染p38δ表达质粒HeLa细胞在正常培养条件下和顺铂处理条件下的细胞凋亡水平都显著上升(P均<0.01).在顺铂处理条件下,与转染对照质粒HeLa细胞相比,转染p38δ表达质粒HeLa细胞Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax和p53蛋白表达水平上升(P均<0.01).顺铂处理HeLa细胞中p38δ磷酸化水平显著上升(P<0.01).与转染野生型p38δ(WT)HeLa细胞相比,转染激酶失活突变体p38δ(K54R) HeLa细胞在正常培养条件下和顺铂处理条件下的细胞凋亡水平都显著下降(P均<0.01).结论 p38δ促进HeLa细胞凋亡并增强其对顺铂的敏感性,且p38δ对HeLa细胞凋亡的调控依赖于其蛋白激酶活性.