目的:研究沉默信息调节因子1( SIRT1)对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞NF-κB p65蛋白乙酰化影响及其保护作用。方法:培养大鼠肾小球系膜细胞,实验分为5组:正常对照组、甘露醇组、高糖组、白藜芦醇组和SIRT1 RNAi组。 MTT比色法检测细胞活性;以实时荧光定量PCR检测SIRT1、单核细胞趋化蛋白1( MCP-1)、血管黏附分子1( VCAM-1)、肿瘤坏死因子α( TNF-α)和转化生长因子β1( TGF-β1) mRNA水平;Western blotting 检测SIRT1和NF-κB p65乙酰化蛋白的表达水平,ELISA检测MCP-1、VCAM-1、TNF-α、TGF-β1和丙二醛( MDA)的含量。结果:高糖刺激使肾小球系膜细胞的活力降低,超氧化物岐化酶( SOD)活性降低,MDA含量增加;SIRT1 mR-NA及蛋白表达降低,NF-κB p65蛋白乙酰化水平增高,MCP-1、VCAM-1、TNF-α、TGF-β1 mRNA和蛋白水平增高。白藜芦醇可逆转高糖引起的变化,而沉默SIRT1基因使高糖诱导的系膜细胞NF-κB p56乙酰化水平、MCP-1、VCAM-1、TNF-α、TGF-β1 mRNA和蛋白水平升高。结论:高糖可降低SIRT1水平,增加炎症因子的表达。 SIRT1的激活可使NF-κB 的亚单位RelA/p65去乙酰化,从而抑制炎症因子的产生。 SIRT1可作为治疗DN的潜在靶点。
作者:杜月光;柴可夫;钱俊文;章科娜
来源:中国病理生理杂志 2014 年 4期