目的:探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)能否通过调控坏死性凋亡(necroptosis)对抗高糖(HG)引起的H9c2心肌细胞损伤。方法:应用Western blot 法检测心肌细胞内能反映坏死性凋亡的RIP3蛋白和cleaved caspase-3蛋白的水平;细胞计数盒测定心肌细胞存活率;双氯荧光素染色荧光显微镜照相法检测细胞内活性氧簇( reactive oxygen species ,ROS)水平;罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位( mitochondrial membrane potential ,MMP);Hoechst 33258核染色荧光显微镜照相法测定凋亡细胞的数量。结果:应用HG (35 mmol/L葡萄糖)处理H9c2心肌细胞3 h、6 h、9 h、12 h和24 h均能明显地上调RIP3蛋白的表达水平,其中24 h时RIP3蛋白水平增加最明显。400μmol/L硫氢化钠( NaHS;为H2 S的供体)预处理或坏死性凋亡的特异性阻断剂necrostatin-1( Nec-1;100μmol/L)共处理心肌细胞均能明显地抑制HG对RIP3蛋白表达的上调作用。此外, NaHS预处理或Nec-1共处理心肌细胞均显著地抑制HG引起的心肌细胞损伤,使细胞存活率升高,ROS生成及MMP丢失减少。另一方面,400μmol/L NaHS预处理心肌细胞能使凋亡细胞数量及cleaved caspase-3表达明显减少。结论:H2 S可通过抑制坏死性凋亡保护心肌细
作者:梁伟杰;何洁仪;张稳柱;余盛龙;陈君;宋明才;陈景福;郑东诞;廖新学
来源:中国病理生理杂志 2016 年 32卷 3期