目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)L1原核表达系统pBAD(B)-HPV11L1,表达HPVL1蛋白,为进一步制备基因工程疫苗奠定基础.方法PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒11型L1基因片段,克隆至pBluescript质粒,并测序.将其从克隆重组质粒中切下连入表达载体,建立pBAD(B)-HPV11L1原核表达重组质粒,在大肠杆菌宿主菌Top10中,经阿拉伯糖诱导,表达融合蛋白L1,经SDS-PAGE电泳和Western blot进行鉴定.结果3株HPV11L1经测序发现变异一致,每株均有2个核苷酸变异,但未影响氨基酸变化.经SDS-PAGE鉴定L1蛋白相对分子质量为59×103,与预期值相同,Western blot证明表达蛋白能与单克隆抗体反应,成功构建了pBAD(B)-HPV11L1原核表达系统.结论所构建的pBAD(B)-HPV11L1原核表达系统能够高效表达HPV11L1蛋白.
作者：庄敏；谷鸿喜；孔卫兰；李迪；魏兰兰；李金梁；林道红
来源：中国地方病学杂志 2004 年 23卷 2期
