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目的:探讨Notch1基因沉默后对滋养细胞增殖与凋亡生物学功能的影响.方法:构建Notch1蛋白基因干扰质粒,体外培养人早孕期胎盘绒毛膜外滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞进行转染.应用实时荧光PCR计数检测转染后Notch1 mR-NA相对表达水平,CCK-8检测细胞转染后活性情况,Western blotting检测Bcl-2凋亡蛋白家族表达情况.结果:同未转染组相比,空白质粒转染组与基因沉默组mRNA相对表达水平分别为0.97±0.03、0.31 ±0.10,基因沉默组mRNA表达与其它两组差异有统计学意义(P<0.05).Notch1基因沉默组同空白质粒转染组相比细胞活性明显下降(P<0.05),同时Notch1基因沉默组抗凋亡蛋白Bcl-2表达较空白质粒转染组明显降低(P<0.05),而促凋亡蛋白Bax表达明显增加(P<0.05).结论:Notch1基因可通过调节Bcl-2凋亡蛋白家族参与滋养细胞增殖与凋亡过程,是胎盘形成发展过程中的正向调节因子.

作者:罗青清;刘晓夏;郑艳芳;赵茵;邹丽

来源:中国妇幼保健 2015 年 30卷 5期

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作者:
罗青清;刘晓夏;郑艳芳;赵茵;邹丽
来源:
中国妇幼保健 2015 年 30卷 5期
标签:
Notch1基因 滋养细胞 细胞增殖 细胞凋亡 胎盘形成 Notch1 gene Trophoblast cell Cell proliferation Cell apoptosis Placentation
目的:探讨Notch1基因沉默后对滋养细胞增殖与凋亡生物学功能的影响.方法:构建Notch1蛋白基因干扰质粒,体外培养人早孕期胎盘绒毛膜外滋养细胞系HTR-8/SVneo细胞进行转染.应用实时荧光PCR计数检测转染后Notch1 mR-NA相对表达水平,CCK-8检测细胞转染后活性情况,Western blotting检测Bcl-2凋亡蛋白家族表达情况.结果:同未转染组相比,空白质粒转染组与基因沉默组mRNA相对表达水平分别为0.97±0.03、0.31 ±0.10,基因沉默组mRNA表达与其它两组差异有统计学意义(P<0.05).Notch1基因沉默组同空白质粒转染组相比细胞活性明显下降(P<0.05),同时Notch1基因沉默组抗凋亡蛋白Bcl-2表达较空白质粒转染组明显降低(P<0.05),而促凋亡蛋白Bax表达明显增加(P<0.05).结论:Notch1基因可通过调节Bcl-2凋亡蛋白家族参与滋养细胞增殖与凋亡过程,是胎盘形成发展过程中的正向调节因子.