背景:炎症因子如IL-1β、TNF-α等可通过一系列级联反应引起关节软骨破坏和炎症反应,在骨关节炎软骨病变中尤为重要。白藜芦醇(resveratrol, Res)具有抗炎、抗氧化等作用,研究Res对软骨细胞炎症因子表达的影响可为其预防、治疗骨关节炎提供参考依据。目的:探讨Res对脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导小鼠软骨细胞核因子-κB (nuclear factor-kappa B, NF-κB)活化及炎症因子基因表达的调节及其相关机制。方法:体外分离培养小鼠膝关节软骨细胞,Ⅱ型胶原免疫荧光检测进行软骨细胞鉴定。根据加入不同培养物分为3组:LPS组(1μg/ml LPS);Res组(100μmol/L Res+1μg/ml LPS);空白对照组。酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组软骨细胞中NF-κB抑制蛋白α(inhibitor of NF-κB-α, I-κBα)的表达量,细胞免疫荧光染色观察NF-κB核转位情况,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)测IL-1β、TNF-αmRNA表达量。结果:荧光显微镜下可见软骨细胞核呈蓝色荧光,胞质呈红色荧光。ELISA检测:LPS组的I-κBα表达量低于空白对照组(P<0.05),Res组明显高于LPS组(P<0.01)。细胞免疫荧光染色检测:与空白对照组相比,LPS组中NF-κB发生明显的核转位,而Res组中NF-κB的核转位受到抑制。RT-PCR检
作者:袁昊;曾晖;肖德明;于斐;林健静
来源:中华骨与关节外科杂志 2016 年 9卷 1期