目的 探究miR-100-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、侵袭和糖酵解的影响及作用机制.方法 收集NSCLC患者手术切除的癌组织和癌旁组织60对,RT-qPCR检测组织和细胞中miR-100-5p的表达,利用Lipofectamine 2000将miR-NC、miR-100-5p mimic、miR-100-5p inhibitor、pc-NC、pc-FGFR3质粒分别或联合转染入H1650细胞,划痕实验检测细胞迁移,Transwell实验检测细胞侵袭,相应试剂盒检测细胞葡萄糖摄取、乳酸生成和ATP含量,Seahorse XF糖酵解应激测试试剂盒和Sea-horse XF细胞线粒体应激测试试剂盒检测细胞外酸化率(ECAR)和细胞耗氧率(OCR),双荧光素酶实验检测靶向关系,蛋白印迹法检测FGFR3蛋白表达水平.结果 miR-100-5p表达与NSCLC患者的性别、年龄和病理类型无关(P>0.05),而与吸烟史、肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移和分化程度有关(P<0.05).miR-100-5p在NSCLC组织和细胞中低表达.与对照组相比,miR-100-5p mimic组划痕闭合率显著较低,侵袭细胞数目显著较少,葡萄糖摄取量、乳酸产生量、ATP含量及ECAR显著较低,OCR显著较高(P<0.01),miR-100-5p inhibitor组划痕闭合率显著较高,侵袭细胞数目显著较多,葡萄糖摄取量、乳酸产生量、ATP含量及ECAR显著较高,OCR显著较低(P<0.01).miR-100-5p靶向下调FGFR3.共转染pc-FGFR3可逆
作者:李晓君;江娟;冯红刚;冯丽;江明
来源:局解手术学杂志 2021 年 30卷 5期