目的:探讨微小RNA-543(microRNA-543,miRNA-5431/miR-543)对大鼠骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞的可能作用及潜在机制.方法:采用膝关节内侧副韧带切断法建立大鼠OA模型,real-time PCR法检测OA模型大鼠软骨组织与正常大鼠软骨组织miR-543的表达差异.体外分离正常膝关节软骨细胞,IL-1β(10 ng/L)共培养24 h模拟体外OA状态,以miR-543 mimics转染软骨细胞,采用M T T、real-time PCR及Western印迹法观察miR-543过表达对IL-1β诱导下软骨细胞增殖及凋亡相关鼠双微体基因4(murine double minute 4,MDM4)、蛋白激酶B1(protein kinase B1,PKB1/Akt1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)表达的影响.结果:OA模型大鼠软骨组织较正常大鼠软骨组织 miR-543表达明显下调(P<0.05).与正常软骨细胞相比,IL-1β诱导后软骨细胞存活率降低(P<0.05),MDM4表达上调,Akt1、Bcl-2表达下调(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-6释放增加(P<0.05);转染miR-543 mimics后,IL-1β诱导的软骨细胞存活率明显升高(P<0.05),MDM4表达下调,Akt1、Bcl-2表达上调(P<0.05),炎症相关因子TNF-α、IL-6 mRNA表达降低(P<0.05).结
作者:李坤;张育民;王亚康;郭建斌
来源:中国临床医学 2018 年 25卷 2期