目的:探讨青藤碱(Sinomenine,SIN)对TLR信号转导通路及髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6( Tumor necrosis factor receptor associated factor-6,TRAF-6)表达的影响,阐明SIN抑制类风湿关节炎( Rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞( Fibroblast-like synoviocytes,FLS)增生导致RA软骨和软骨下骨破坏造成关节畸形的作用机制。方法:体外培养RA-FLS细胞,分为对照组与(0.125、0.25、0.5、1 mmol/L) SIN组,通过检测各组细胞内碱性磷酸酶( ALP)活性,确定体外用药最佳药物浓度;CCK-8法检测0.5 mmol/L SIN组的细胞增殖率;荧光定量PCR法测定对照组与0.5 mmol/L SIN组MyD88和TRAF-6基因表达;Western blot法检测对照组与0.5 mmol/L SIN组MyD88和TRAF-6蛋白表达。结果:SIN各组ALP活性均低于对照组,其中以0.5 mmol/L SIN组的ALP活性为最低(P<0.01)。 CCK-8法检测,0.5 mmol/L SIN组RA-FLS细胞增殖率明显低于对照组( P<0.01),SIN诱导第4天细胞增殖率最高,进入平台期,之后细胞的增殖率开始下降。荧光定量PCR和Western blot法检测,0.5 mmol/L SIN组的MyD88和TRAF-6基因及蛋白表达明显低于
作者:张洪长;刘明昕;张莹;王恩鹏;陈港;姜鸿远
来源:中国免疫学杂志 2015 年 4期